Никита Кривушкин - Пособие по изучению иммунного ответа. Патофизиология TLR и её влияние на механизмы развития патогенеза заболеваний иммунной системы

• Название: Пособие по изучению иммунного ответа. Патофизиология TLR и её влияние на механизмы развития патогенеза заболеваний иммунной системы
• Автор: Никита Кривушкин
• Жанр: Химия

Книга для всех и не для кого – данное руководство по иммунологии должно помочь разобраться студенту, начинающему или уже практикующему врачу, доктору наук с современными проблемами в медицине по части иммунологии: понять приводящие механизмы систем TLR-S, их роль в развитии и распространении патогенеза и симптоматики различных патологий организма, усвоить генетическую составляющую патофизиологических состояний и узнать новые терапевтические мишени для их лечения.

---

Высокий уровень экспрессии tlr2 у больных с низким риском по сравнению с другими.

Пациенты (B) с различными уровнями экспрессии TLR6 в группах высокого риска, среднего и низкого риса. (С—D) Соотношение tlr2 и 6 и общей выживаемости больных. (E) Пациенты с tlr2 и-F217S. (F) Предложена модель потенциального взаимодействия tlr2 и-JMJD3-у ил8.

(A) Количество миелоидных колоний и эритроидных колоний образуется после двух недель трансдукции tlr2 и-shRNA, выделенных от больных с низким риском МДС. (B) представитель микрофотографии колоний образуется в виде пластин после трансдукции tlr2 и-shRNA (левая панель) и управления shRNA (правая панель). (C) анализ уровня РНК CD71, ЭПО, GYPA и GATA1 в клетке, собранные из общей колонии после трансдукции.

Анализ методом проточной цитометрии нормальных cd34+ клеток после лечения с MALP2 или PAM3CSK4 в течение 48 часов.

По сравнению с контролем, лечение привело к снижению доли ранних эритроидных прогениторных клеток. (B) краткое изложение анализа проточной цитометрии из CD71+ и HLADR – клеток в первичной БМ cd34+ клеток от четырех разных доноров. (C) Среда поддерживает формирование колонии, анализы показали пониженный уровень формирования эритроидных колоний.

TLR-3

TLR-3– мембранный белок, основная функция которого заключается в связывании двухцепочочной РНК вирусов и таким образом, играет важную роль в противовирусной защите организма.

Естественным лигандом рецептора является молекула двухцепочечной РНК. В силу своей симметричной природы РНКовый дуплекс обеспечивает связывание двух молекул TLR3, повёрнутых навстречу друг другу. Такая димеризация является сигналом, активирующим каскад последующих внутриклеточных процессов этого сигнального пути. В экспериментальных исследованиях используется аналог двухцепочечной РНК – поли. Чем длиннее этот полимер, тем лучше он активирует рецептор TLR3.

Данный рецептор находится на внешней плазматической мембране клетки и в мембране эндосом. Таким образом, клетка отвечает на проникновение вирусной РНК, которая попадает внутрь клетки в процессе эндоцитоза. Двухцепочечные РНК самой клетки находится в цитоплазме и в силу своей локализации не попадает в зону действия TLR3. Однако, при разрушении соседних клеток высвобождающаяся РНК может вступить во взаимодействие с ТЛР3, что может вызвать неблагоприятные реакции организма.

Энтеровирус 71 (ЭВ71) инфекции стал одной из основных угроз для детей во всем мире в последние годы. TLR3 играет важную роль в иммунной защите против ЭВ71 инфекции. Это исследование было разработано для оценки возможной связи между TLR3c.1377C/T полиморфизм и механизмом протекания ЭВ71 инфекции.

Уровни сывороточных ИФН-γ и ил-4 были измерены с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Наличие ТТ генотипа (р = 0.030) и аллель Т (или 1.8; 95% ди, 1.2—2.8; р = 0,010) встречались чаще в тяжелых случаях. Плазменные уровни ИФН-γ и ИФН-γ/ил-4 соотношение было значительно ниже ТТ (102.0 ± 24.2 ПГ/мл, р <0,01 и 14,2 ± 2.8, р <0,001) и ТТ генотипов (114.1 ± 26.2 ПГ/мл, р <0,05 и 18,0 ± 3.1, р <0,001) по сравнению с СС генотипом (135.5 ± 36.8 ПГ/мл и 24,9 ± 4.7), но плазменные уровни ил-4 с ТТ (7.3 ± 1.7 ПГ/мл, р <0,01) и ТТ генотипов (6.4 ± 1.3 ПГ/мл, р <0,05) были достоверно выше по сравнению с СС генотипом (5.5 ±1.3 ПГ/мл).

Эти данные свидетельствуют о том, что TLR3c.1377T аллель связан с восприимчивостью к тяжелым ЭВ71.

Хотя подавление экспрессии генов TLR-3 в основном сообщалось у пациентов, инфицированных вирусом гепатита С, влияние TLR-3 на генотип и на риск развития HCV-инфекции, связанных с циррозом печени и/или гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК) еще предстоит определить.

TLR-3 SNPs были проанализированы у когорты из 563 пациентов с гепатитом С, которая состояла из 437 больных хронической HCV-инфекцией, 88 с HCV-индуцированным циррозом печени, и 38 с ГЦК. Среди TLR-3, в rs78726532 SNPs были тесно связаны с HCV-инфекцией. rs5743314 SNPs также был сильно связан с прогрессированием заболеваний печени (цирроза и ГЦК).

В целом, эти результаты показывают, что различные генетические варианты TLR-3 SNPS связаны с HCV-инфекцией и гепатитом.

Цифры в квадратах показывают отличие среди SNps.

Воздействие TLR-3 на прогрессирование и последствия ОНМК пациентов не выяснено до сих пор. Мы стремились оценить уровень экспрессии TLR03 мРНК включая в исследование пациентов с различными формами протекания заболевания.

Восемьдесят шесть случаев ишемического инсульта в течение 14 дней разделены между собой на 2 группы: с благоприятным протеканием заболевания (N = 47) и неблагоприятным исходом (N = 39) в зависимости от значение по модифицированной шкале Ренкина баллы (≤2 балла за 90 дней после инсульта -хороший результат). Мы измерили уровень экспрессии мРНК в каскаде системы TLR-3 в мононуклеарных клетках периферической крови больных за 24 часа, 3 суток, 4 суток, 7 дней и 14 дней от начала заболевания соответсвенно. Результат и объем инсульа оценивали при поступлении и на 7—14 день соответственно.

Только экспрессия TLR-3 на мРНК дала хороший результат группе с благоприятным исходом, чем у пациентов с неблагоприятным протеканием заболевания при острой и подострой фазах. Кроме того, обе группы не имели существенных различий с точки зрения взаимодействия между мРНК и TLR-2. Экспрессия интерферона β в исследовании была значительно выше у группы с благоприятным протеканием заболевания, чем у когорты пациентов с неблагоприятным исходом болезни, и он имел положительную корреляцию с экспрессией TLR-3 и оказывал регуляторную функцию на фактор интерферона 3.

Взаимосвязь между TLR3 + интерферон β + мРНК повышены в периферической крови больных с ишемическим инсультом с благоприятным исходом, которое может повлечь их дальнейшей нейропротекции.

TLR-3 принимает участие в обострении бронхиальной астмы и может способствовать ее дальнейшему развитию. Однако, генетическая связь между TLR-3 и астмой остается пока неопределенной. Цель этого исследования-оценить влияние полиморфизма TLR-3 в пределах от риска астмы. В данное исследование были включены в общей сложности 462 неродственных взрослых пациента с астмой и 398 здоровых добровольцев.

Генотипыодиночных нуклеотидных полиморфизмов (Онп) TLR-3 определяли с помощью мультиплексного снимка генотипирования SNP анализа. Результаты показали, что генетические вариации SNP в TLR-3 были связаны с астмой + с измерением сывороточного уровня иммуноглобулина Е. Однако, не было никакой очевидной связи между TLR-3 SNP и установкой патогенеза, чувствительности или степени тяжести астмы.

TLR-3 полиморфизм может играть значительную роль в патогенезе астмы. Это поможет лучше понять патогенез бронхиальной астмы и повлияет на разработку более эффективных стратегий для профилактики, прогнозирования и лечения астмы.

Иммунопатогенез хронического гепатита В (ХГВ) еще не выяснен до конца. TLR-3 являются рецепторами, которые инициируют распознавательную функцию иммунитета с экзогенно-эндогенных лигандов и играет важную роль в патогенезе инфекции. В данном исследовании мы стремились исследовать частоту TLR-3 (rs3775290) полиморфизм и его роль у пациентов с ХГВ. Мы включили 50 здоровых лиц в качестве контрольной группы и 73 пациента с активной и 43 с неактивной формой гепатита B.

Все образц ДНК были выделены из проб крови. Для обнаружения TLR-3 (rs3775290) однонуклеотидного полиморфизма, нами был получен полиморфизм длин рестрикционных фрагментов. Самые высокие уровни HBV ДНК были обнаружены у лиц с ТТ генотипом. Кроме того, частота генотипа СС была выше у больных с активной фазой ХГВ по сравнению с неактивной ВГВ пациентов (p = 0.044). Статистически значимая разница экспрессии TLR-3 (rs3775290) однонуклеотидного полиморфизма была выявлена между здоровыми добровольцами и больными гепатитом в (п = 0.342).

В заключение, уровень ДНК HBV была выше у лиц с ТТ генотипом, и генотип СС встречался чаще у лиц с преобладанием активной фазы ХГВ. Эти результаты свидетельствуют о возможной ассоциации и взаимосвязи между патогенезом болезни и экспрессией TLR-3 (rs3775290) однонуклеотидного полиморфизма.

Новые доказательства от нынешней вспышки вируса Зика (ZIKV) указывает на прочную причинно-следственную связь между самим вирусом и возникновением микроцефалии. Чтобы выяснить, как ZIKV инфекция приводит к микроцефалии, мы использовали эмбриональные стволовые клетки церебральных органоидов на первом триместре развитие мозга плода. Здесь нам показывают, что штамм прототип ZIKV-MR766, эффективно заражает органоиды и вызывает уменьшение общего размера органа, который коррелирует с кинетикой нарастания количества вирусных копий.

TLR-3 был активируются и начинают распознавание патогенов после заражения органоидов и нейросферы мыши и происходит ингибирование TLR-3. Анализ путей генных изменений экспрессии при активации TLR-3 предполагает, что нарушения также связаны с развитием нейронов, и как следствие, приводит к нарушению нейрогенеза.